不同類型的Elisa試劑盒在設(shè)計(jì)上的主要區(qū)別如下：

1. 直接法 vs. 間接法

直接法

使用酶標(biāo)記的一抗直接結(jié)合抗原

優(yōu)點(diǎn): 操作簡單

缺點(diǎn): 靈敏度較低

間接法

使用未標(biāo)記的一抗結(jié)合抗原后,再用酶標(biāo)記的二抗進(jìn)行信號(hào)放大

優(yōu)點(diǎn): 靈敏度更高

缺點(diǎn): 步驟更多,背景噪音可能增加

2. 夾心法 (Sandwich ELISA)

需要兩種匹配抗體,分別作為捕獲抗體和檢測抗體

優(yōu)點(diǎn): 特異性強(qiáng),適合大分子(如蛋白質(zhì))

缺點(diǎn): 成本高,需優(yōu)化配對(duì)

3. 競爭法 (Competitive ELISA)

待測抗原與標(biāo)記抗原競爭結(jié)合有限數(shù)量的抗體

優(yōu)點(diǎn): 適合小分子或半抗原

缺點(diǎn): 靈敏度較低,結(jié)果需反向解讀

4. TRF/CLEIA (時(shí)間分辨熒光/化學(xué)發(fā)光)

采用熒光或發(fā)光信號(hào)代替顯色底物

優(yōu)點(diǎn): 超高靈敏度,適合低豐度靶標(biāo)

缺點(diǎn): 需專用儀器,成本高

5. Instant/Ready-to-use ELISA

部分組分預(yù)包被或凍干,減少操作步驟

優(yōu)點(diǎn): 快速簡便

缺點(diǎn): 靈活性較低

總結(jié)選型關(guān)鍵點(diǎn)

類型                          適用場景                              核心差異

夾心法             大分子蛋白質(zhì)定量                   雙抗體配對(duì)設(shè)計(jì)

競爭法             小分子/半抗原                            反向信號(hào)解讀

直接/間接法簡單篩查 vs. 高靈敏度需求           一抗是否標(biāo)記